采用部分重叠引物设计，使PCR呈指数扩增，扩增产物凝胶电泳可见；扩增产物为环状，易于转化。DMT酶消化体外降解非突变型质粒模板(甲基化质粒模板)和DMT感受态细胞体内降解非突变型质粒模板(甲基化质粒模板)，从而有效地筛选突变克隆。