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Annexin V 是检测早期细胞凋亡的最灵敏指标之一。正常细胞中，磷脂酰丝氨酸 (PS)只分布在细胞膜磷脂双分子层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞质膜内侧的磷脂酰丝氨酸发生外翻，暴露于细胞质膜的外侧。Annexin V是一种与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，因此能够利用Annexin V与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸相结合的性质，检测细胞的早期凋亡。将 Annexin V进行绿色荧光 (FITC) 标记，以标记了的Annexin V-FITC 作为探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶 (PI)是一种核酸染料，它不能透过具备完整细胞膜的正常细胞和早期凋亡细胞，但能够透过凋亡中晚期的细胞和坏死细胞的细胞膜而将细胞核染色，在特定激发光条件下呈现红色。
将 Annexin V-FITC与 PI 匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。在双变量流式细胞仪的散点图上，若横坐标表示Annexin V信号，纵坐标表示PI信号，则左下象限 (Annexin V-/PI-) 代表活细胞；右下象限(Annexin V+ /PI-) 代表早期凋亡细胞；右上象限(Annexin V+ /PI+)代表凋亡晚期细胞和坏死细胞；左上象限(Annexin V-/PI+) 被认为是许可范围内的检测误差。
Jurkat T 淋巴瘤细胞经 Camptothecin 诱导发生凋亡后的流式细胞仪检测结果
1 Shao F, Li Y, Hu W, et al. Downregulation of CISD2 has prognostic value in non-small cell lung cancer and inhibits the tumorigenesis by inducing mitochondrial dysfunction[J]. Frontiers in Oncology, 2021.(IF 6.20)
2 Liao N, Su L, Zheng Y, et al. In vivo tracking of cell viability for adoptive natural killer cell‐based immunotherapy by ratiometric NIR‐II fluorescence imaging[J]. Angewandte Chemie, 2021.(IF 15.33)
3 Wang L, Zhan J, Huang W. Grape seed proanthocyanidins induce apoptosis and cell cycle arrest of HepG2 cells accompanied by induction of the MAPK pathway and NAG-1[J]. Antioxidants, 2020.(IF 6.31)
